溴氰菊酯抗性白纹伊蚊抑制消减cDNA文库的构建

摘要

目的构建溴氰菊酯抗性白纹伊蚊抑制消减cDNA文库。方法分别提取白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株(R-lab株)和敏感株(S-lab株)总RNA,纯化后获得mRNA,并反转录为双链cDNA。以R-lab株mRNA作为实验方(tester),S-lab株mRNA作为驱动方(driver),以及R-lab株mRNA为driver方,S-lab株mRNA为tester方,进行正、反双向抑制性消减。富集的差异表达cDNA克隆到pMD18-T载体,构建白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性和敏感双向消减文库。结果分别从正向文库和反向文库中获得580和477个阳性克隆,从所构建文库随机挑选150个克隆进行PCR鉴定,阳性克隆率为93%,cDNA片段主要分布于150～750bp。结论构建了抗溴氰菊酯白纹伊蚊抑制消减cDNA文库。