紧密连接蛋白-2表达及定位变化与胰腺癌细胞解离的关系

摘要

目的:探讨紧密连接蛋白-2(Tjp-2)表达及定位变化与胰腺癌细胞解离的关系.方法:采用RT-PCR和Western blot分别检测解离型高转移株(PC-1.0)和非解离型低转移株(PC-1)胰腺癌细胞中Tjp-2的基因和蛋白表达,利用免疫细胞化学方法确定PC-1.0和PC-1细胞中Tjp-2的细胞内定位变化.最后分析Tjp-2的表达及细胞内定位变化与胰腺癌细胞解离的相关性.结果:Tjp-2mRNA和蛋白在PC-1.0细胞中过度表达,在PC-1细胞中表达均较弱.U0126(丝裂原活化蛋白激酶激酶抑制剂)抑制PC-1.0细胞中Tjp-2mRNA的表达,含细胞解离因子的培养液上清(DF-CM)则诱导PC-1细胞中Tjp-2mRNA表达增加.在PC-1.0细胞中Tjp-2蛋白主要分布于细胞质(FI=3273.7±131.2),U0126处理后细胞边缘部位的Tjp-2表达显著增强(FI=2814.8±297.0,P=0.003).在PC-1细胞中Tjp-2蛋白主要分布于细胞间连接部位(FI=401.5±41.3),经DF-CM处理后细胞间连接部位Tjp-2表达明显减弱(FI=135.6±15.8,P=0.024),再经U0126处理后Tjp-2蛋白再次向细胞间连接部位聚集(FI=382.6±34.1,P=0.072).结论:Tjp-2基因表达及蛋白的细胞内定位变化参与调控胰腺癌细胞解离.Tjp-2可作为抗胰腺癌侵袭转移分子靶向治疗的新靶点.