布鲁菌脉冲场凝胶电泳图谱分型方法建立

摘要

目的建立我国95株布鲁菌的染色体DNA脉冲场凝胶电泳图谱，进行布鲁菌的分子遗传学分类鉴定。方法选择我国不同地区、不同时限分离的布鲁菌100株（包括19株标准布鲁菌株），应用SeaKem Gold琼脂糖胶块纯化布鲁菌完整的染色体DNA，限制性内切酶XbaI消化后，进行脉冲场凝胶电泳分离（PFGE）。结果XbaI酶切布鲁菌基因组DNA后，可产生20～500kbp范围的15～25条酶切片段．并可以在PFGE凝胶上被很好的区分开。PFGE可在种的水平上区分布菌各种标准株，76株中国分离株可被分为39种PFGE类型，并聚为4大类。PFGE与传统分型方法比较，2者的一致性达63％。结论脉冲场凝胶电泳图谱可对布鲁菌进行遗传学分类鉴定，在布鲁菌的分子流行病学研究中具有重要意义。