膜结合型TNF-α基因转导人胃癌细胞株的建立及其生物学特性研究

摘要

本研究利用逆转录病毒载体LXSN构建了插入突变的膜结合型TNF-α基因的重组逆转录病毒载体，将重组载体及空载体导入包装细胞CRIP．筛选G418抗性克隆。测定病毒滴度均为1×10^4CFU／ml，并转入胃癌细胞MGC-803．经筛选分别获得抗性克隆MGC-803^T及MGC-803^T,经Southern杂交证实目的基因已整合在MGC-803^T细胞基因组中。MGC-803^T对L929细胞有杀伤作用．而对照细胞无杀伤作用。MGC-803^T细胞的形态，体外增殖率无明显改变。裸鼠体内接种结果表明，与对照组相比，MGC-803^T细胞在裸鼠体内的生长受到明显抑制，表现为肿瘤发生延缓．肿瘤重量明显减轻。上述结果表明．逆转录病毒介导的突变型膜结合型TNF-α基因可在人胃癌细胞中获得有效表达．并能改变其生物学特性。