霍乱弧菌毒力表达调控基因及霍乱、黑热病双价口服活疫苗候选株的研究

摘要

目的研究霍乱弧菌毒力表达调控基因与霍乱弧菌毒力之间的关系 ,构建霍乱、黑热病双价口服活疫苗候选株。方法首先采用PCR扩增、Southern印迹杂交及原位杂交对我国不同群型霍乱弧菌毒力表达调控基因toxR、toxS、toxT的分布进行研究 ;然后采用自杀性质粒和接合转移技术构建霍乱弧菌toxR基因缺失株 ,并与原出发菌株比较 ,确定toxR基因对霍乱弧菌毒力表达调控机制 ;再用基因定向置换技术构建霍乱、黑热病双价口服活疫苗候选株。结果霍乱弧菌毒力表达调控基因与霍乱弧菌毒力表达有关 ;霍乱弧菌toxR蛋白是霍乱肠毒素的正调控因子 ,是霍乱弧菌主要外膜蛋白 (4 0kDa、4 3kDa)编码基因的负调控因子。结论初步构建霍乱。