婴儿双歧杆菌介导HSV-TK/GCV自杀基因治疗系统对裸鼠肾细胞癌肿瘤细胞凋亡及NF-κB活性的影响

摘要

目的:证实婴儿双歧杆菌(bifidobacterium infantis,BI)介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)/丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)自杀基因系统对裸鼠肾癌的治疗作用,检测其诱导裸鼠肾癌组织细胞凋亡的作用及对核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的影响。方法:引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液法建立裸鼠皮下荷瘤肾癌模型,并随机分为BI-pGEX-TK/GCV组(重组质粒组)、BI-pGEX-5X-1/GCV组(空质粒组)、BI/GCV组(空BI组)和生理盐水/GCV对照组(生理盐水组)。分别经尾静脉注射BI-pGEX-TK、BI-pGEX-5X-1、BI和生理盐水,联合腹腔注射GCV,4周后,称取裸鼠质量及肿瘤质量。TUNEL法检测各组肿瘤细胞凋亡情况,qRT-PCR、Western blot检测各组肿瘤组织Rel A、Caspase-3mRNA及蛋白表达水平。结果:(1)重组质粒组荷瘤裸鼠体质量明显高于其余3组(P=0.006),肿瘤组织质量明显降低(P=0.003)。(2)TUNEL法检测发现各组均有不同程度的肿瘤细胞凋亡,以重组质粒组最为明显(P=0.000)。(3)与空质粒组、空BI组及生理盐水组比较,重组质粒组Rel A蛋白表达明显下调(P=0.000),Caspase-3蛋白表达明显上调(P=0.000)。结论:BI介导HSV-TK/GCV自杀基因系统对荷瘤裸鼠肾癌有明显的抑制作用,可能通过影响NF-κB信号通路的活性,诱导荷瘤裸鼠肾癌肿瘤细胞的凋亡,发挥抑癌作用。