肺组织蛋白质组双向电泳技术的建立

摘要

目的对肺组织蛋白质组分析中的双向电泳 (2 -DE)技术进行质量控制。方法通过多种条件的组合与优化 ,建立以物理和化学两种方法充分裂解组织细胞 ,并采用低温操作、加入蛋白酶抑制剂等防止蛋白降解 ,最后离心去除不溶性杂质的肺组织蛋白质组 2 -DE样品制备方法。第 1向电泳为固相pH梯度等电聚焦、第 2向电泳为垂直平板SDS -PAGE(T =13)。结果通过对蛋白定量、样品制备、第 1向和第 2向电泳中的各个实验环节进行控制和优化 ,正常大鼠肺组织在 18cmpH 3- 10L的胶上可分离 72 0个点左右 ,蛋白点平均匹配率为 72 .2 %。结论建立了肺组织蛋白质组双向电泳技术 。