谷胱甘肽耗竭在丁烯酸内酯诱导的细胞毒性中的作用

摘要

目的本课题组前期研究显示,镰刀菌毒素丁烯酸内酯(Butenolide,BUT)能够引起HepG2细胞内谷胱甘肽(GSH)含量的降低,且该事件介导了BUT诱导的细胞毒性。现采用不同的巯基含量调节剂调节细胞内GSH水平,进一步阐明GSH耗竭在BUT诱导的细胞毒性中的作用。方法不同的GSH含量调节剂:GSH耗竭剂马来酸二乙酯(DEM)以及巯基化合物GSH和N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理HepG2细胞后,染毒BUT。采用Beutler改良法测定细胞内GSH的含量,MTT法测定细胞存活率。结果1mmol/LDEM作用细胞30min可明显降低细胞内GSH的含量,而与50μg/mlBUT联合作用30min可进一步耗竭细胞内的GSH,使细胞内GSH含量分别由二者单独作用时的44%和47%降至22%。1mmol/LDEM单独作用30min无明显的细胞毒性,但其预处理却能增强BUT的细胞毒性,使细胞存活率由50μg/mlBUT单独作用8h时的51%降至41%。1mmol/LGSH和5mmol/LNAC预处理细胞30min可明显抑制BUT引起的细胞内GSH含量的降低,使GSH含量由50μg/mlBUT单独作用30min时的33%分别增至82%和91%。与对细胞内GSH含量的保护作用相一致,GSH和NAC预处理可完全抑制BUT的细胞毒性,使细胞存活率由50μg/mlBUT单独作用细胞8h时的47%分别提高至115%和112%。结论采用GSH耗竭剂和巯基化合物调节细胞内GSH含量可明显影响BUT的细胞毒性,这一结果进一步阐明,GSH的耗竭介导了BUT诱导的细胞毒性。