中国旋毛虫分离株成虫和新生幼虫基因文库的构建及筛选

摘要

利用λＺＡＰⅡ载体构建了中国分离株Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ及Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｎａｔｉｖａ成虫和新生幼虫ｃＤ－ＮＡ基因文库，检测结果表明，所克隆的ｃＤＮＡ片段分布在０．２～２．０ｋｂ之间，表明２个ｃＤＮＡ基因文库对ｍＲＮＡ的覆盖面很大。利用ＲＡＰＤ技术，以肌幼虫基因文库作对照，采用７０个单引物及２０对复合引物对以上２个文库进行筛选扩增，结果：（１）共获得２条Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ及４条Ｔ．ｎａｔｉｖａ的成虫与新生幼虫特异性基因片段，鉴于成虫与新生幼虫是旋毛虫的２个侵袭性阶段，其所特有的特异性基因片段极有可能就是这２个时期虫体的侵袭性因子基因，即所要寻找的强保护性抗原基因，从而为后续研究奠定了基础；（２）发现１条Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ种特有的基因片段，这一特异性基因片段为虫种鉴定提供了物质条件；（３）发现旋毛虫同种不同分离株（中国分离株及法国分离株）间ｃＤＮＡ文库扩增图谱完全相同。