体外受精后不同时间收集的牛胚胎的冷冻效果

摘要

比较了体外受精后不同时间收集的牛囊胚期胚胎冷冻后的存活率。试验一收集受精后第６，７，８和９天出现的胚胎，分３步加入０．７５ｍｏｌ／Ｌ甘油和０．５ｍｏｌ／Ｌ丙二醇，将胚胎装入０．２５ｍＬ细管后，放入已降温至５℃的冷冻机内，立即以２℃／ｍｉｎ的速率降温至－７℃，停留５ｍｉｎ后植冰。植冰后５ｍｉｎ，以０．３℃／ｍｉｎ的速率降温至－２５℃，取出胚胎，并立即投入液氮中保存。解冻时，先让细管在空气中暴露１０ｓ，然后投入２０℃水中。在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖溶液中１０ｍｉｎ稀释防冻剂。经体外培养９６ｈ后，第７天胚胎的存活率最高（７２．７％），显著高于第８天胚胎的存活率（５４．３％，Ｐ＜０．０１）。第６天、第９天胚胎的存活率分别为１８．８％和１８．２％，均显著低于第７天、第８天胚胎的存活率（Ｐ＜０．０１）。试验二用非手术法将２枚第７天或第８天的冷冻胚胎移入处于发情周期第７天的育成母牛子宫内，移植第７天一、二级胚胎的妊娠率分别为２８．１％（９／３２）和２１．６％（８／３７）；移植第８天一、二级胚胎的则分别为３３．３％（７／２１）、１７．６％（６／３４），４组间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。４个组的双胚胎率分别为１１．１％（１／９?