高强度聚焦超声对溶菌酶结构的影响

摘要

目的:探讨高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)对一种蛋白质—溶菌酶结构的影响。方法:使用频率0.94 MHz、声强3.25×104 W/cm2、脉冲重复频率4 Hz、占空比10%的脉冲高强度聚焦超声辐照溶菌酶溶液10 s。利用圆二色光谱(CD光谱)、荧光光谱、核磁共振氢谱(1H nuclear magnetic resonance,1H-NMR)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel,SDS-PAGE)方法,分别研究高强度聚焦超声对溶菌酶二级、三级和四级结构的影响。结果:高强度聚焦超声处理后,CD光谱无明显变化,表明高强度聚焦超声对溶菌酶二级结构影响不大;而荧光强度减弱,说明溶菌酶色氨酸周围的疏水结构发生了变化;SDS-PAGE结果显示,经高强度聚焦超声辐照后溶菌酶出现支链降解;分析1H-NMR发现,辐照后溶菌酶色氨酸发生了化学位移。结论:高强度聚焦超声可以改变溶菌酶的高级结构。