DNA浓度及注射时间对苹果花粉管通道法基因转化率的影响

摘要

通过花粉管通道法,将携带CBF3和GUS基因的pWBVec10a质粒DNA导入苹果。坐果后70d左右采收种子,将收获的种子进行离体培养,培养基为MS+BA0.2mg/L+GA2.0mg/L,附加蔗糖50g/L,琼脂6g/L,培养40d后对转化子叶进行GUS染色检测。结果表明,最佳注射时间为授粉后11～24h之间。随着注入外源DNA浓度的增加,坐果率逐渐降低,DNA浓度为500μg/ml时,坐果率可达3.1%;DNA浓度为1000μg/ml时GUS基因阳性表达率可达12.5%。