新疆陆地棉（花粉管通道法）导入外源DNA后代生物特性的研究

摘要

本文主要是运用棉花花粉管通道法，对新疆陆地棉进行有益外源基因的转化，统计分析和观察研究棉花转基因后代(T<,0>-T<,n>代)的生物学特性(生长情况、遗传分离等)及改进外源基因的操作方法和水平，提高外源基因的转化率和表达率。 1.根据观察研究、分析对比，对新疆棉花花粉管通道技术的操作中出现的问题进行了改进，详细阐述了导入(注射)外源DNA的基本要求：受体材料的要求、注射棉铃的选择、剥去花朵花冠的操作要求、注射外源DNA的要领、外源基因质粒的浓度及保活、外源基因注射时间及注射量的确定等。 2.转基因植株(T<,0>-T<,n>代)的检测和鉴定准确性研究，合理地应用了试验田(标记基因鉴定)及实验室(PCR检测)两个方面的鉴定，确保了转基因材料的纯度。 3.比较详细地描述了T<,0-4>转基因棉花植株的一般性生物学特征、特性，分析了转基因植株与非转基因植株的不同点及相同点，揭示了部分T<,0-4>转基因棉花植株的变化规律及转基因棉花的一代代成长过程。 4.利用试验田及实验室两个方面的鉴定，分析统计了T<,2-n>转基因棉遗传分离现象，多数的统计结果表明：大部分转基因后代的遗传分离，不符合孟德尔遗传分离定律，呈现出后代遗传分离的多样性。

目录

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第一章引言

1.1实用价值和理论意义

1.2花粉管通道法的理论基础

1.3国内外研究现状

1.4本研究要解决的问题

第二章材料与方法

2.1棉花受体材料的选择

2.2棉花幼铃果台的选择

2.3棉花幼铃剥花方式

2.4注射器(微量进样器)的要求和操作

2.5外源基因质粒载体的制备方法

2.6棉花外源DNA导入(注射)时间的确定

第三章结果与分析

3.1 T0棉花受体材料的生长情况

3.2棉花幼铃果台的选择

3.3注射未落铃与正常铃比较

3.4 T1转基因植株生物学表现

3.5 T2转基因植株生物学表现

3.6 T3转基因植株生物学表现

3.7 T4转基因植株生物学表现

3.8 T5-n转基因棉花植株生物学表现

第四章讨论

4.1棉花利用花粉管通道法导入(注射)外源DNA的基本要求

4.2 T1-n代转基因棉的筛选和检测

4.3 T0-4转基因棉的生物学特征特性

4.4 T2-n转基因棉的遗传分离

参考文献

致谢

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