新的纤溶酶产生菌培养条件及其酶性质研究

摘要

采用定向筛选方法,分离到一株能产生强烈分解纤维蛋白的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)EM29-5.对其生长、产酶条件、酶性质进行系统研究,结果表明:生长和产酶温度25-37℃,37℃时最好;生长最适pH6.4-7.0,产酶为pH7.0-8.0;12种碳源氮源均能利用,但对生长和产酶均有利的是大豆浸出液EM29-5.纤溶酶为外分泌蛋白酶,发酵上清液经硫酸铵沉淀,透析脱盐,上离子交换柱和凝胶过滤柱后得纯酶.经SDS-PAGE电泳得单一条带,分子量为32500左右;等电聚焦电泳分析PI9.0左右;酶蛋白在pH5.0-10.0范围内稳定;作用最适pH9.0,为碱性蛋白酶;5mmPMSF能完全抑制酶活性,为氨酶蛋白酶;不能分解人工合成的氨基酸的酯,而能分解纤维蛋白(原),特别对交联纤维蛋白具更高亲和性.