灵芝多糖对H22肝癌小鼠肠道黏膜免疫功能的影响

摘要

目的观察灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)抗肿瘤的黏膜免疫机制。方法将H22细胞浓度调整为1×109个/L,于昆明小鼠右腋下行无菌皮下接种,每只小鼠接种0.2mL细胞悬液,接种后随机将动物分为模型组、GLP组、环磷酰胺(cytoxan,CTX)组、GLP+CTX组,另设空白对照组,每组8只。于造模后第2天,GLP组及GLP+CTX组分别以1.02g/(kg.d)灌胃GLP,每天1次,连续12天;CTX组及GLP+CTX组分别于第1天及第6天按100mg/(kg.d)腹腔注射CTX;空白对照组与模型组以等量蒸馏水灌胃。于造模后第14天,拉颈处死小鼠,分离小肠,取盲肠上端1cm处回肠,4%多聚甲醛固定,石蜡切片,采用免疫组化(iHC)的方法检测免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)及IL-10的表达;剩余小肠分离肠道上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IEL)、固有层内淋巴细胞(lamina propria lymphocytes,LPL)及PP结内淋巴细胞(peyer′s patch lymphocytes,PPL),采用免疫荧光染色及流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群的变化。结果(1)与正常组比较,模型组肠道黏膜淋巴细胞表型及肠道内细胞因子的表达均发生改变,并且各部位的淋巴细胞表型变化不同;(2)与模型组比较,GLP、CTX及GLP+CTX均能不同程度的调节肠道黏膜淋巴细胞的表型及细胞因子的表达。结论GLP对肠道黏膜免疫的调节作用可能是其发挥抑瘤作用的另一条途径。