内质网相关降解蛋白Derlin-1通过抑制ERK信号通路抗人结肠癌细胞增殖

摘要

目的:探讨内质网相关降解蛋白Derlin-1对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:采用sh-Derlin-1-pGPU6/Neo质粒转染构建瞬时敲除Derlin-1基因的SW480细胞株,应用实时定量PCR和免疫印迹验证Derlin-1基因和蛋白的低表达,采用CCK8法检测SW480细胞增殖情况,流式细胞仪检测SW480细胞凋亡情况,Western blot检测SW480细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达量和ERK磷酸化水平。结果:使用pGPU6/Neo载体能够稳定地抑制SW480细胞中Derlin-1的表达,sh-Derlin-1组细胞增殖率相对于对照组显著降低、凋亡率显著升高(P <0. 05),Western blot实验结果发现sh-Derlin-1组细胞中Bcl-2表达量显著降低、Bax表达量显著升高及ERK磷酸化水平显著降低,与对照组相比差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:Derlin-1表达的降低能抑制ERK信号通路活化,进而诱导人结肠癌SW480细胞凋亡、抑制增殖。