大肠埃希菌中疟原虫MSP1-17编码基因蛋白重组及表达

摘要

目的为免疫原性及疟疾特异性早期诊断研究，以及高效抗红内期疟原虫复合多价基因疫苗的研究提供基础。方法（1）以鼠约氏疟原虫MSP1编码基因为模板，片段自4855到5271共416bp，扩增出PyMSP1 DNA片段，将该片段克隆入质粒pPGEX-2T，构建含有GST编码的质粒pGEX-2T-PyMSP1-17。（2）用上述构建的质粒植入大肠埃希菌DH-5α表达重组蛋白。结果（1）构建出约氏疟原虫裂殖子表面蛋白1融合基因片段真核重组表达质粒。（2）获得MSP1-GST融合蛋白，在大肠埃希菌DH一5a收获到重组的约氏疟原虫裂殖子表面蛋白浓度为46mg／L。（3）原核表达的蛋白产物免疫小鼠后分离血清，采用间接免疫荧光法（IFA）检测疟原虫，滴度在1：400～1：1000之间均可识别IFA血片中的疟原虫。结论设计重组MSP1-17基因在大肠埃希菌中真核系统内能够得到充分表达，并具有免疫原性和抗原性。无论是作为DNA疫苗研究的候选者抑或是制备特异性抗体进行疟疾早期诊断都具有重要的意义；由于该抗原的表达量高、免疫原性强，是目前很有希望的疟疾疫苗候选抗原之一。