蔵灵菇源克鲁维酵母M3菌株胆盐水解酶的特性研究

摘要

探讨蔵灵菇马克斯克鲁维酵母M3菌株胆盐水解酶作用底物的反应条件与金属离子对酶活性的影响及其发酵动力学类型。采用单因素多水平试验方法,在pH4～8、温度31～43℃、底物浓度4～8mmol/L及不同化学试剂(SDS、EDTA、尿素、Cu2+、Mg2+、Ca2+、Fe3+、Al3+、Mn2+)的条件下,胆盐水解酶与底物反应30min,检测酶活力;平板活菌计数法分析细胞生长与产酶的关系;双倒数作图法求得酶促反应动力学常数Km。结果表明,胆盐水解酶最适反应条件:pH为6.0、底物浓度为7mmol/L、温度为37℃,Mn2+、Fe3+、Ca2+金属离子对酶活性有较大提高作用,其他化学试剂对酶活性影响不大。M3菌株在18～21h进入稳定期,于18h对数生长期时酶活性达到最高,表明其胆盐水解酶发酵动力学类型为生长偶联合成型。其酶促反应动力学常数Km为2.60mmol/L,说明该酶与最适底物的亲和力较大。