抑制脊髓转化生长因子β激活激酶影响大鼠鞘内吗啡耐受的信号机制

摘要

目的探讨转化生长因子B激活激酶（TAK1）选择性抑制剂5Z-7-oxozeaenol缓解慢性吗啡耐受的信号机制。方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠，体重220～250g，采用Yaksh法行鞘内置管。将40只置管成功的大鼠随机分入5组，每组8只。对照组大鼠鞘内注射0．9％氯化钠溶液10μL。吗啡组大鼠鞘内注射吗啡15μg。抑制剂＋0．9％氯化钠溶液组大鼠鞘内注射5Z-7-oxozeaenol1μg，30min后鞘内注射0．9%氯化钠溶液10μL。20％二甲基亚砜（DMSO）＋吗啡组鞘内给予20％DMSO 10μL，30min后鞘内注射吗啡15μg。抑制剂＋吗啡组大鼠鞘内注射5Z-7-oxozeaenol 1μg，30min后鞘内注射吗啡15μg。每天给药1次，连续给药7d。每天给药结束30min后行缩爪实验检测大鼠缩爪痛阈值，计算最大镇痛效应百分比（MPEP）。连续给药7d后，大鼠断头取脊髓腰膨大。采用免疫印迹法测定脊髓内c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的表达，以及磷酸化JNK（p-JNK）、磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）水平。结果吗啡组和20％DMSO＋吗啡组大鼠给药第1～5天的MPEP均显著高于对照组（P值分别〈0．001、0．05），抑制剂＋吗啡组大鼠给药第1～7天的MPEP均显著高于对照组（P值均〈0．001），抑制剂＋吗啡组大鼠给药第3～7天的MPEP均显著高于吗啡组（P值分别〈0．01、0．001）。吗啡组和20％DMSO＋吗啡组的p-JNK表达水平均显著高于对照组（P值均〈0．01），抑制剂＋吗啡组的p-JNK表达水平显著低于吗啡组（P〈0．001）。吗啡组和20％DMSO＋吗啡组的P—p38MAPK表达水平均显著高于对照组（P值均〈0．001），抑制剂＋吗啡组的p-p38MAPK表达水平显著低于吗啡组（P〈0．001）。结论5Z-7-oxozeaenol与吗啡合用可有效缓解吗啡耐受，抑制慢性吗啡处理所致脊髓内p-JNK和p-p38MAPK表达水平的升高。5Z-7-oxozeaenol通过下调TAK1／JNK和TAK1／p38MAPK活化水平缓解吗啡耐受。