Survivin基因特异性siRNA腺病毒介导的肿瘤放射增敏作用

摘要

目的:构建携带沉寂Survivin基因表达特异性siRNA的重组腺病毒载体,观察其在荷瘤动物体内对Survivin基因的表达以及对瘤细胞放射敏感性的影响。方法:设计合成针对Survivin基因序列的siRNA,构建并重组腺病毒AdEGFP-siR-NA。建立裸鼠SMMC7721肝癌移植瘤模型,分5组进行实验,siRNA+放疗组和siRNA组以AdEGFP-siRNA瘤内多点注射,siRNA(-)组以AdEGFP-siRNA(-)瘤内多点注射,隔日1次,每次2×108pfu/100μl,共5次;单纯放疗组和空白对照组以等量生理盐水代替病毒注射;于第10、12、14、16天siRNA+放疗组和单纯放疗组给予5Gy/次的照射;定时测量瘤体体积;观察周期结束,取瘤组织免疫组化检测Survivin蛋白的表达。结果:成功构建并重组表达Survivin基因特异性siRNA序列和绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的腺病毒AdEGFP-siRNA。裸鼠SMMC7721移植瘤在注射AdEGFP-siRNA后生长受到明显抑制,抑瘤率为56.2%;AdEGFP-siRNA病毒治疗和放疗结合,可将抑瘤率提高到82.6%。移植瘤组织免疫组化检查显示,特异性siRNA显著降低了肝癌细胞Survivin的表达。结论:Survivin特异性siRNA能够沉寂其基因的表达和抑制肿瘤的生长,同时可以提高肿瘤细胞的放射敏感性,改善治疗效果。