深绿卷柏总双黄酮对H9c2心肌细胞缺氧复氧的保护作用

摘要

目的 探究深绿卷柏总双黄酮对缺氧复氧(HyPoxia/Reoxygenation,H/R)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用.方法 采用95％乙醇回流提取深绿卷柏,通过D101大孔树脂富集得到深绿卷柏总双黄酮.采用MTT比色法筛选深绿卷柏总双黄酮最佳药物浓度、药物作用时间和细胞缺氧时间,再通过流式细胞术筛选最佳复氧时间.将H9 c2心肌细胞分为对照组(Control组)、H/R模型组(Model组)和深绿卷柏总双黄酮25、50、100μg/mL浓度组,分别检测细胞中白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、乳酸脱氢酶(Lumber disc herniation,LDH)、白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)以及肌酸激酶同工酶MB(Creatine kinase-MB,CK-MB)的水平变化.结果 通过富集纯化得到纯度为56％的深绿卷柏总双黄酮7.85 g.通过MTT比色法和流式细胞术得到最佳条件为:深绿卷柏总双黄酮浓度为100μg/mL,药物作用时间12 h,细胞H/R时间为缺氧12 h复氧4 h(H12R4 h).在最佳处理条件下,与Model组比较,100μg/mL浓度组细胞中的IL-6、TNF-α、LDH和CK-MB的含量显著降低(P<0.01),IL-10的含量显著升高(P<0.01).结论 深绿卷柏总双黄酮对H9 c2心肌细胞缺氧复氧诱导的损伤具有良好的保护作用.