酪氨酸蛋白激酶抑制剂对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖肥大的影响

摘要

为明确自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞(SHR-VSMC)增殖与血小板源生长因子-AA(PDGF-AA)、PDGF-α受体表达的关系及酪氨酸蛋白激酶在其中的作用,我们在培养的血管平滑肌细胞中,采用免疫印迹(Westernblot)、3H-TdR及3H-Leu掺入等方法,观察在不同来源大鼠(SHR/Wistar)血管平滑肌细胞中,PDGF-AA、PDGF-α受体及PDGF-β受体表达的差异性;在PDGF-AA刺激下细胞的增殖、肥大反应及酪氨酸蛋白激酶抑制剂(genistein)对其的影响.结果表明:在SHR-VSMC中PDGF-AA、PDGF-α受体蛋白表达明显高于Wistar-VSMC,而PDGF-β受体蛋白表达在SHR-VSMC与Wistar-VSMC无明显差异;在不同浓度PDGF-AA(2、5、10、20)ng/mL刺激下,SHR-VSMC中PCNA表达呈剂量依赖性增高P＜0.01;加入酪氨酸激酶抑制剂,SHR-VSMC中PCNA表达呈剂量依赖性显著减少P＜0.01.在不同浓度PDGF-AA(2、5、10、20)ng/mL刺激下,SHR-VSMC中3H-Leu、3H-TdR掺入率呈剂量依赖性增强;加入酪氨酸激酶抑制剂SHR-VSMC中3H-Leu、3H-TdR掺入率显著减少.PDGF与其受体结合后,可激活受体细胞膜内的酪氨酸蛋白激酶,导致蛋白分子磷酸化的级联反应,启动MAPK、PKC等信号转导通路,调节特定基因的表达或通过改变细胞内相应蛋白质的功能状态导致细胞的增殖肥大.本实验应用酪氨酸激酶抑制剂genistein阻断酪氨酸激酶活性,证实阻断PDGF-AA所介导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖肥大,关键是阻断酪氨酸蛋白激酶的活性,酪氨酸蛋白激酶介导的信号转导在其中发挥重要作用.