一种高效检测致病性钩端螺旋体PCR改良方法及效果评价

摘要

目的比较评价1种致病性钩端螺旋体(钩体)的聚合酶链式反应(PCR)改良方法与3种现行标准方法的检测效果,用于病人早期诊断与宿主动物监测。方法对《全国病媒生物病原学监测方案(试行)》推荐致病性钩体检测方法(方法3)增加一步反转录反应过程,不改变引物和探针,形成改良方法(方法4)。分别采用方法4、卫生行业标准推荐方法(方法1)、检验检疫行业标准推荐方法(方法2)和方法3,4种PCR方法平行检测不同稀释度的钩体阳性标本、病人早期血清及鼠肾标本,评价其检测效果。结果方法4的灵敏度分别是方法1、2、3的10000、10000及1000倍。仅有方法4能在病人早期血清中检出钩体核酸。4种方法对于100份鼠肾标本中的钩体检出率分别是2.00%、4.00%、8.00%和40.00%。方法4与方法1、2、3的阳性检出率差异有统计学意义(均P0.05)。结论获得的改良方法对钩体病人早期血清和鼠肾标本的核酸检测效果,均明显优于其他3种现行标准检测方法。