水稻EIN3/EIL转录因子家族克隆与表达分析

摘要

乙烯是植物体内的重要激素,除了参与调控植物生长发育与各种胁迫响应以外,还参与调控植物的缺铁响应。EIN3/EIL转录因子家族被认为参与植物乙烯信号转导。前期本课题组报道了水稻(Oryza sativa) bHLH型转录因子OsbHLH156是一个响应缺铁的关键调控因子,酵母单杂交结果显示EIN3/EIL转录因子家族能与OsbHLH156启动子结合。为了进一步研究EIN3/EIL转录因子家族在水稻铁稳态中的作用,本研究对水稻EIN3/EIL家族6个转录因子进行生物信息学分析;通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的烟草(Nicotiana tabacum)瞬时表达,观察水稻EIN3/EIL转录因子家族的亚细胞定位,并利用实时荧光定量PCR技术分析不同组织中水稻EIN3/EIL转录因子家族编码基因的表达水平以及缺铁条件下的表达水平。结果表明,与拟南芥(Arabidopsis thaliana)乙烯调控核心转录因子AtEIN3相比,水稻EIN3/EIL转录因子家族在基因结构上具有保守性,OsEIL1、OsEIL2与AtEIN3在进化树上位于同一分支,蛋白相似性最高。亚细胞定位结果显示除OsEIL6以外的其他5个成员均定位于细胞核。组织表达模式分析显示6个水稻EIN3/EIL基因主要在根茎叶中表达。缺铁条件表达模式分析显示OsEIL2、OsEIL3受缺铁诱导。本研究为水稻EIN3/EIL转录因子家族的进一步功能研究奠定基础。