奥美拉唑对Hp感染人胃黏膜上皮细胞增殖、凋亡、自噬及炎症的影响及机制研究

摘要

目的探讨奥美拉唑(OME)对幽门螺杆菌(Hp)感染的胃黏膜上皮细胞增殖、凋亡、自噬、炎症的影响及其机制。方法人胃黏膜上皮细胞GES-1用Hp感染,不同浓度的OME处理或用si-NC、si-GAS5、si-GAS5与anti-miR-NC、si-GAS5与anti-miR-221-3p转染。采用MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA检测IL-1β、IL-6、TNF-α水平,qRT-PCR检测GAS5、miR-221-3p表达量,双荧光素酶报告实验与RIP实验检测GAS5与miR-221-3p的靶向关系,Western blot检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达。结果与对照组比较,Hp组细胞活力、GAS5水平降低(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、miR-221-3p水平升高(P<0.05),与Hp组比较,OME不同剂量组细胞活力、GAS5水平升高(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、miR-221-3p水平降低(P<0.05),与Hp+OME+si-NC组比较,Hp+OME+si-GAS5组细胞活力降低(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),与Hp+OME+si-GAS5+anti-miR-NC组比较,Hp+OME+si-GAS5+anti-miR-221-3p组细胞活力升高(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白、IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低(P<0.05),双荧光素酶报告实验与RIP实验证实GAS5可靶向结合miR-221-3p。结论OME通过调控GAS5/miR-221-3p轴促进Hp感染的胃黏膜上皮细胞增殖,抑制细胞凋亡、自噬及炎症反应。