用于动物细胞种属鉴定及交叉污染检测的同工酶电泳技术改良

摘要

目的 改良现有的用于动物细胞种属鉴定和交叉污染检测的同工酶电泳技术。方法 在传统的同工酶电泳基础上，将巴比妥缓冲液换成Tris-Gly缓冲液，将聚丙烯酰胺凝胶换成琼脂糖凝胶，以两种人源细胞（人宫颈癌细胞系HeLa、人肺癌细胞系A549）、两株小鼠来源细胞（小鼠成纤维细胞系L929、NIH/3T3）为样本进行体系优化，通过分析3种常用同工酶（葡萄糖-6-磷酸脱氢酶G6PD、苹果酸脱氢酶MD和核苷磷酸化酶NP）在优化的电泳条件下的酶谱，探索最适配方和电泳条件。结果 改良后的15 mmol/L Tris-Gly琼脂糖凝胶同工酶电泳体系，能在室温条件下完成电泳及显色检测，获得的G6PD、MD、NP等3种酶的酶谱条带与传统的巴比妥缓冲体系一致，证明本体系优化成功。结论改良的Tris-Gly琼脂糖凝胶同工酶电泳能在室温操作、操作简易，可用于动物细胞种属鉴定及交叉污染的检测。