小鼠金属硫蛋白 Ⅰ cDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达

殷慎敏; 时晓冰; 李令媛; 茹炳根

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小鼠金属硫蛋白 Ⅰ cDNA编码序列的克隆及其在昆虫细胞中的表达

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将质粒ｐＢＸ－ＭＴ上的小鼠ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ片段切下作为模板，通过ＰＣＲ方法删除该片段的非编码序列，将编码序列克隆到质粒ｐＢＳ－ＳＫ中，经ＤＮＡ序列测定后证明其克隆序列正确．再将ＭＴ－ⅠｃＤＮＡ编码序列插入到转移载体ｐＢａｃＰＡＫ８的ＢａｍＨⅠ和ＥｃｏＲⅠ位点之间，通过磷酸钙／ＤＮＡ共转染方法将其导入昆虫细胞Ｓｆ９中，以Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＤｏｔＥＩＡ方法对表达产物进行了检测，表达量为１ｍｇ／Ｌ

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |1997年第4期||共页
作者
殷慎敏; 时晓冰; 李令媛; 茹炳根;
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作者单位

北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类动物学 ;
关键词
金属硫蛋白（MT）; PCR; 共转染; Sf9细胞;

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