瑞香狼毒提取液逆转EGFR-TKI耐药肺腺癌H1975细胞的作用及其机制

摘要

目的:探讨瑞香狼毒（stellera chamaejasme L,SCL）乙醇提取液逆转表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKI）耐药肺腺癌H1975细胞的作用及其机制。方法:用MTT法检测SCL、吉非替尼（gefitinib）及两药联用对H1975细胞的抑制率,细胞划痕实验检测药物对H1975细胞迁移的影响,流式细胞术测定药物对细胞凋亡的影响,Western blotting检测不同药物处理后各组肿瘤细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及细胞通路关键分子p-EGFR的表达。观察SCL联用gefitinib后裸鼠移植瘤的体积和总生存期（OS）,ELISA检测荷瘤裸鼠血清中Bcl-2、p-EGFR含量。结果 :SCL对H1975细胞IC50为（21.35±2.11）mg/ml,gefitinib的IC50为（11.21±1.68）μmol/L。SCL联用gefitinib后H1975细胞抑制率明显高于gefitinib（1μmol/L）和SCL（5 mg/ml）两组单独应用[（49.78±7.09）%vs（8.45±2.57%）、（12.88±3.64）%,均P＜0.01],两药联用H1975细胞迁移指数明显低于gefitinib和SCL两组单独应用[（22.4±6.5）%vs（70.3±4.9）%、（67.1±10.5）,均P＜0.01],流式细胞仪检测显示两药联用细胞凋亡率明显高于两者单用[（51.68±6.56）%vs（9.88±2.71）%、（9.48±2.45）%,均P＜0.01],Western blotting检测H1975细胞凋亡相关蛋白发现,联用组可明显降低Bcl-2和p-EGFR的表达（P＜0.01）。抑制移植瘤实验显示,联用药组荷瘤小鼠肿瘤生长缓慢,OS明显延长（P＜0.01）。结论:SCL可逆转肺腺癌H1975细胞对EGFR-TKI的耐药,其机制可能与降低EGFR的磷酸化、下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达有关,从而为EGFR-TKI耐药肺腺癌治疗提供了新思路。