竹叶花椒提取物诱导BRL 3A细胞产生DNA损伤和凋亡的机制研究

摘要

目的 探讨竹叶花椒甲醇提取物（ZADCM）对大鼠肝细胞BRL 3A的DNA损伤和凋亡的潜在作用机制。方法 体外培养大鼠正常肝细胞（BRL 3A）,CCK-8法测量细胞毒性，荧光探针测定ROS变化，微核实验检测细胞染色体损伤，彗星实验检测DNA损伤，流式细胞术测定细胞凋亡情况，Western blot测定DNA损伤相关蛋白以及凋亡相关蛋白表达量。结果 随着ZADCM浓度增加，细胞存活率下降，具有时间-剂量关系；ZADCM可以剂量依赖方式诱导细胞内ROS累积，导致染色体损伤与DNA损伤，表现为微核细胞率、细胞尾长、尾部DNA含量、OTM值以及γH2AX、p-ATM和p-Chk2表达量升高；并进一步诱导细胞凋亡。结论 竹叶花椒甲醇提取物可导致细胞存活率下降，直接诱导细胞内ROS升高，进一步引起细胞染色体损伤和ATM介导的DNA损伤，最终导致细胞凋亡。