脯氨酸羟化酶2对脂肪间充质干细胞旁分泌介导的心肌保护的影响

摘要

目的观察RNA干扰脂肪间充质干细胞脯氨酸羟化酶2(PHD2)对其旁分泌介导的心肌保护作用的影响及其机制。方法慢病毒包装PHD2干扰载体转染第三代人脂肪间充质干细胞(ADSC)。H2O2(100μmol/L)刺激新生大鼠心肌细胞(NRVM)6h,建立体外氧化损伤模型。ADSC条件培养液(CM)预处理NRVM,TUNEL染色和免疫印迹法检测caspase-3蛋白表达,观察H2O2诱导的心肌细胞凋亡。ELISA方法检测ADSC-CM的促存活细胞因子:血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和肝细胞生长因子(HGF)。结果 PHD2干扰-ADSC-CM较空载体-ADSC-CM预处理明显减少NRVM的凋亡,TUNEL阳性率降低30.3%,caspase-3蛋白表达降低24.8%。PHD2干扰后ADSC-CM中IGF-1明显增加。IGF-1中和抗体干预后PHD2干扰-ADSC-CM的抗心肌细胞凋亡作用明显受抑制。结论 PHD2干扰增强了ADSC旁分泌介导的心肌保护作用,其机制可能为增加ADSC促存活细胞因子IGF-1的分泌。