转化生长因子β_1/Smad通路调控糜酶诱导心脏成纤维细胞胶原合成

摘要

背景心脏肥大细胞的糜酶参与心肌纤维化,但其作用机制尚不清楚。目的探讨糜酶对大鼠心脏成纤维细胞(CFs)胶原合成的影响及其与转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路的关系。方法用胰酶消化法分离、培养新生SD大鼠的CFs,采用3H脯氨酸掺入法测定CFs的胶原合成,Western blot检测TGF-β1、磷酸化Smad2/3(P-Smad2/3)及总的Smad2/3的蛋白表达水平。结果糜酶以浓度依赖方式增加CFs的3H脯氨酸掺入率。15、30和60μg/L组3H脯氨酸掺入率分别为(520±75)、(684±62)和(769±58)计数/(min.孔),均高于对照组[(435±60)计数/(min.孔),P0.05)。TGF-β1中和抗体和P-Smad2/3抑制剂预处理组3H脯氨酸掺入率均低于30μg/L糜酶组(P<0.01)。结论糜酶具有促进CFs胶原合成的作用,其机制可能与TGF-β1/Smad信号通路的活化有关。