超高效液相色谱-串联质谱法测定血清中叶酸代谢物

摘要

建立了超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）定量检测人体内叶酸6种主要代谢产物的方法。采用BEH C18色谱柱（2.1×50 mm,1.7μm）,以甲酸-乙腈为流动相,流速为0.4 m L/min,进样体积5μL,梯度洗脱法进行分离,电喷雾正离子模式下以多反应检测（MRM）方式检测,外标法定量。6种叶酸代谢产物检出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为0.05～0.20 ng/m L和0.15～0.50 ng/m L,6种代谢产物（叶酸、5-甲基四氢叶酸（5-Me THF）、5-甲酰四氢叶酸（5-Fo THF）、同型半胱氨酸（Hcy）、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷高半胱氨酸（SAH））分别在一定范围内呈线性相关,相关系数R2≥0.998;在血清样品中加标回收率为90.1%～105.3%,日内和日间RSD均小于6%。