高甲硫氨酸蛋白基因的克隆及转化大豆的研究

摘要

为克隆高甲硫氨酸蛋白基因并导入大豆以提高大豆甲硫氨酸(Methionine,Met)含量,本研究首次报道利用同源克隆的方法从芦苇中克隆高甲硫氨酸蛋白基因,并利用农杆菌介导法将高甲硫氨酸蛋白基因导入大豆。基因克隆及测序结果表明该基因编码区420 bp,编码139个氨基酸,其中含有21个Met,Met含量达到15.11%。GUS组织化学染色、荧光定量PCR和测序结果表明,该基因已整合进大豆基因组中。8株转基因大豆叶片甲硫氨酸含量测定表明:各转基因植株甲硫氨酸含量均有不同程度提高,最高幅度达51.11%。本研究可为高必需氨基酸贮藏蛋白编码基因的克隆和转化及大豆品质改良及其功能研究提供借鉴。