超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法同时分析尿中4种内源性雄激素和孕激素

摘要

目的建立同时分析尿中4种内源性雄激素(睾酮和雄烯二酮)和孕激素(孕酮和21α-羟化孕酮)的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法。方法取1.0 ml尿样用β-葡萄糖醛酸酶水解,C18固相萃取小柱净化,用C18超高效液相色谱柱和含10 mmol/L乙酸铵的甲醇和水流动相梯度洗脱分离后,采用串联四极杆质谱电喷雾阳离子多反应监测模式分析,内标标准曲线法定量。结果在0.1 ng/ml^100 ng/ml浓度范围内,4种内源性激素呈现良好的线性关系,相关系数为0.992~0.9995。以3倍基线噪声所对应的浓度为检出限时,4种内源性激素检出限在0.06 ng/ml^0.12 ng/ml之间。在1 ng/ml和5 ng/ml的加标水平时,4种内源性激素加标回收率平均值为99.4%~111.6%,相对标准偏差在3.2%~14.7%之间。该方法成功用于实际尿样中4种内源性激素的分析。结论该方法快速,灵敏,准确,完全满足尿中上述4种内源性激素的分析要求。