二代测序法分析儿童肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液中Th1/Th2的平衡

摘要

目的应用二代测序技术(next-generation sequencing,NGS)检测肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中,Th1细胞因子IFNγ、Th2细胞因子IL-4的表达水平及免疫应答的平衡变化趋势。方法提取支气管异物、MPP轻症及重症患儿BALF样本,应用NGS技术中转录组测序技术进行深度测序,根据基因表达量检测IFNγ、IL-4表达水平,并计算IL-4/IFNγ比值;采用Real-time q PCR法对样本的IFNγ、IL-4、IL-4/IFNγ相关趋势进行验证。结果 MPP轻症患儿BALF中IL-4、IFNγ表达水平及IL-4/IFNγ比值均较支气管异物对照组升高,MPP重症患儿BALF中IL-4、IFNγ水平较轻症组和支气管异物对照组升高,IL-4/IFNγ比值较支气管异物对照组升高,较轻症组有所下降。结论在MPP患儿免疫反应中,MPP轻症及重症患儿BALF中两类细胞因子均有所升高,IL-4/IFNγ比值变化趋势表明Th1/Th2存在失衡现象,MPP轻症组、重症组与支气管异物对照组相比,平衡向Th2移动,因此,平衡以Th2反应占优势为主。