临床分离纹带棒状杆菌喹诺酮类耐药株gyrA和parC基因突变的研究

摘要

目的探讨gyrA、parC基因的改变与纹带棒状杆菌耐喹诺酮类抗生素的关系。方法采用微量稀释法测试纹带棒状杆菌对环丙沙星、左旋氧氟沙星、万古霉素的敏感性。PCR扩增检测gyrA和parC基因喹诺酮类耐药决定区相关片段并测序,在GenBank中进行Blast及BlastX分析并观察氨基酸突变位点,用NcoI酶进行PCR-RFLP。结果 37株纹带棒状杆菌对环丙沙星和左旋氧氟沙星的耐药率为94.6%,30株菌发生双突变(87位Ser突变为phe,91位Asp突变为Ala),5株菌单点突变(87位Ser突变为phe)。PCR-RFLP经NcoI酶切后显示,敏感株和耐药株均产生3个条带。结论纹带棒状杆菌对环丙沙星、左旋氧氟沙星的耐药率较高,对万古霉素全部敏感。纹带棒状杆菌对喹诺酮类抗生素的耐药机制主要是gyrA突变引起的,尤以双突变占优势。纹带棒状杆菌不携带parC基因,不编码拓扑异构酶IV。