临床分离耐喹诺酮类解脲支原体gyrA和parC基因突变的检测

摘要

目的:研究临床分离的耐喹诺酮类解脲支原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）gyrA基因和parC基因突变情况。 方法:应用支原体液体培养及固体培养，通过药敏试剂盒检测筛选出对喹诺酮类药物（包括环丙沙星、氧氟沙星、司帕沙星）耐药的Uu15株，提取其DNA，应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增gyrA和parC基因的喹诺酮耐药决定区（Quinolone-Resistant Determining Region，QRDR），并将扩增的目的基因片段进行纯化测序，测序后采用Blast比对法分析临床耐药株与解脲支原体血清3型标准菌株（ATCC700970）的序列差异。 结果:5株单纯环丙沙星耐药的Uu有3株仅出现了parC的点突变，即248位C突变为T，致83位丝氨酸变为亮氨酸：另2株未发现突变。而10株表现为两种或三种喹诺酮类药物交叉耐药的Uu的gyrA和parC两个基因片段均出现了点突变，其中9株的parC突变位置同上，另有一株第298位C突变为T，未发生氨基酸的改变；gyrA为第336位C突变为A，致112位天冬氨酸被谷氨酸取代。 结论:分离到的15株Uu有13株存在QRDR的突变，可能是导致Uu对喹诺酮类耐药的重要因素；且gyrA和parC两个基因同时存在突变可能与多种喹诺酮类药物交叉耐药相关；此外，临床分离Uu对喹诺酮类药物耐药可能还存在其他耐药机制。

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文摘

英文文摘

论文说明：主要英文缩略语索引

声明

前言

一、材料和方法

二、结果

三、讨论

四、结论

6．参考文献

附图

综述 解脲支原体氟喹诺酮耐药性的分子机制

致谢