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β-榄香烯对分化型甲状腺癌细胞TPC-1131I敏感性的影响及机制研究

     

摘要

目的 探讨β-榄香烯对分化型甲状腺癌细胞TPC-1131碘(I)敏感性的影响及相关机制。方法 将TPC-1细胞随机分为对照组、131I组、β-榄香烯组和131I+β-榄香烯组。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测TPC-1细胞存活率,克隆形成实验检测TPC-1细胞克隆形成数,流式细胞术检测TPC-1细胞凋亡率,Hoechst 33258染色检测TPC-1细胞凋亡形态,Transwell检测TPC-1细胞迁移水平,蛋白免疫印迹(Western blot)检测TPC-1细胞细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、p-p65、p65、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)和核因子κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达水平。结果 对照组、131I组、β-榄香烯组、131I+β-榄香烯组的细胞存活率依次是100.00%±0.00%、83.69%±15.13%、91.35%±14.30%和56.13%±9.05%,克隆形成数依次是507.19±72.31、421.25±65.43、453.30±79.80和317.71±53.24。与对照组比较,131I组TPC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移数和CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9水平明显降低(P<0.05),凋亡率和p21、Bax、p-p65/p65、p-IκBα/IκBα水平明显增加(P<0.05),与131I组比较,131I+β-榄香烯组TPC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移数和CyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9、p-p65/p65、p-IκBα/IκBα水平明显降低(P<0.05),凋亡率和p21、Bax水平明显增加(P<0.05)。对照组和β-榄香烯组细胞核呈均匀的淡蓝色,131I组和131I+β-榄香烯组细胞核出现碎裂、浓缩、染色呈亮蓝色等凋亡特征,且131I+β-榄香烯组的凋亡特征更明显。结论 榄香烯可提高TPC-1细胞131I敏感性,其机制可能与β-榄香烯抑制131I引起的核因子κB(NF-κB)信号通路激活有关。

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