miR-142影响甲状腺癌细胞增殖分化的机制研究

摘要

目的 探讨miR-142对甲状腺癌细胞增殖与分化的作用机制.方法 通过RT-PCR检测人甲状腺癌细胞K1、BCPAP、TPC-1和人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中miR-142的表达水平.细胞分别转染miR-142 mimics siIQGAP.MTT法检测细胞存活率与增殖能力.构建wt-IQGAP1和mut-IQGAP1载体,利用双荧光素酶活性检测鉴定靶基因.Western blot检测甲状腺癌细胞K1中IQGAP1的表达情况.结果 甲状腺癌细胞K1、BCPAP、TPC-1中的miR-142相对表达量与甲状腺细胞相比显著降低(P<0.05),三种甲状腺癌细胞中K1细胞的表达量最低.从转染后12 h开始,miR-142 mimics组与空白组、mimics control组相比,甲状腺癌细胞生长抑制明显.预测miR-142的靶基因可能为IQGAP1,转染miR-142 mimics野生型IQGAP1中荧光素酶活性较突变型IQGAP1中荧光素酶活性显著降低(P<0.05).转染miR-142 mimics组甲状腺癌K1细胞IQGAP1蛋白明显下降,miR-142负调控IQGAP1的表达.抑制甲状腺癌K1细胞中IQGAP1基因,细胞增殖能力减弱,细胞中IQGAP1蛋白表达减弱.结论 miR-142在甲状腺癌细胞中表达下调,miR-142可以通过负调控靶基因IQGAP1抑制甲状腺癌细胞的增殖分化.