miR-30d通过自噬调控影响未分化型甲状腺癌细胞对顺铂治疗敏感性的研究

摘要

目的:研究miR-30d对未分化型甲状腺癌(ATC)细胞顺铂治疗敏感性的影响,并探讨其内在分子机制。
　　方法:利用miR-30d mimic使miR-30d低表达的ATC细胞过表达miR-30d,采用细胞生物学、分子生物学、药理学和动物实验学等多种方法研究:1)miR-30d对细胞自噬的影响及其内在调控机制;2)在体外(细胞水平)和体内(动物水平)研究miR-30d介导的自噬激活对化疗药物顺铂治疗敏感性的影响。
　　结果:本研究发现:1)萤光素报告基因分析证实beclin1的3’-UTR存在与miR-30d相结合序列,并可负性调控beclin1(一个自噬相关基因)的表达。转染miR-30d mimic后,beclin1的萤光素报告基因活性、mRNA及蛋白水平均显著降低;2)miR-30d可抑制顺铂诱导的自噬激活,表现为自噬相关蛋白LC3 II(microtubule-associated protein1light chain)水平下调、GFP-LC3荧光颗粒数减少;3)miR-30d过表达可增强ATC细胞对顺铂的敏感性,表现为细胞活力减弱、凋亡细胞数增加,以及凋亡相关蛋白cleaved PARP和cleaved Caspase3蛋白表达上调;4)过表达beclin1能部分逆转miR-30d引起的自噬水平下调及凋亡增加,表现为转染beclin1质粒后,LC3 II水平上调,cleaved PARP和cleaved Caspase3蛋白表达下调以及细胞凋亡数减少;5)在接种ATC细胞移植瘤模型裸鼠体内,增加miR-30d表达能够增强顺铂的抑癌效应,表现为肿瘤体积减小、凋亡细胞数增加、细胞增殖能力减弱。
　　结论:miR-30d可通过负性调控beclin1的表达抑制自噬激活,并增强ATC细胞对化疗药物顺铂的敏感性。以上这些发现有助于我们进一步了解miR-30d在肿瘤发生发展中的作用,并为肿瘤的预防和治疗提供了一个可能的潜在靶点。

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研究背景

一．未分化型甲状腺癌

二．自噬与肿瘤

三．MicroRNA

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

实验结果

1.miR-30d可负性调控beclin 1表达

2.miR-30d可抑制顺铂诱导的自噬激活

3.过表达miR-30d可增强ATC细胞对顺铂治疗的敏感性

4.过表达beclin 1可部分逆转miR-30d mimic引起的细胞自噬下调和细胞凋亡增加。

5.在ATC移植瘤裸鼠模型体内miR-30d过表达能够增强顺铂的抗癌效应

讨论

参考文献

创新点

综述

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