痰湿壅盛证高血压大鼠模型的建立与评价

摘要

目的观察痰湿壅盛证高血压模型大鼠的证候表现、理化指标及可能的病理机制。方法 50只Wistar大鼠采用高脂饲料饲养的方法制备痰湿壅盛证大鼠模型,同时设对照组(10只),给予普通饲料饲养。两组均持续饲养25周后,选取造模大鼠中体重、血压均超过对照组平均值25%的大鼠纳入模型组(22只)。检测两组大鼠体重、血压、血脂及相关血清学指标;观察靶器官形态变化;采用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测主动脉中瘦素受体(leptin receptor,LepR)、Janus蛋白络氨酸激酶2(Janus kinase2,Jak2)、信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,Stat3)、细胞因子信号抑制蛋白-3(suppressor of cytokine signaling-3,Socs3)、血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡreceptor type 1,AT1)、AT 2、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶(serine threonine kinase,Akt)、核转录因子kBp65(nuclear factor of kappa B,NF-κBp65)、核因子kB激酶抑制蛋白α(inhibitor of nuclear factor kappa-B kinaseα,IKKα)、核因子kB抑制蛋白β亚基(NF-kappa-B inhibitorβ,IKKβ)、核因子kB抑制蛋白α亚基(NF-kappa-B inhibitorα,IKBα)和磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)mRNA表达水平。根据qPCR结果,分别采用免疫组化和Western blot检测主动脉中AT1、LepR的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠体重、血压、血脂升高,血清Lep、AngⅡ、同型半胱氨酸(Hcy)、内皮素1(ET-1)、TNF-α、IL-6、β_2微球蛋白(β_2-MG)升高,NO下降,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。模型组大鼠主动脉内皮损伤、平滑肌细胞增生,伴发心、肾损害。与对照组比较,模型组大鼠主动脉中LepR、Jak2、Stat3、Socs3、AT1、PI3K、Akt、NF-κB p65、IKKβ、IKBα、AMPK mRNA表达上调(P<0.05),IKKα下调(P<0.05)。免疫组化显示:模型组AT1和LepR棕黄色沉积明显增多、阳性部位分布更加广泛。Western blot显示:与对照组比较,模型组大鼠主动脉中AT1和LepR蛋白表达增加(P<0.05)。结论模型大鼠呈现典型的证候特征,体重增加,呈腹形肥胖状态,毛色黯淡,纳呆嗜睡,活动度下降,饮食减少,便溏,舌黯红,苔白厚腻。瘦素可作为评价痰湿壅盛证高血压大鼠模型的客观指标之一。