骨桥蛋白单抗抑制大鼠肺纤维化的研究

摘要

探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的大鼠肺纤维化肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属基质蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。取72只健康雌性Wistar大鼠随机分成生理盐水对照组(NS组)、博莱霉素模型组(BLM组)和骨桥蛋白抗体干预组(OPN-Ab组)各24只,气管内灌注BLM复制肺纤维化模型(BLM组、OPN-Ab干预组),NS组气管内灌注生理盐水,OPN-Ab组于0d、2d、4d、6d尾静脉注射骨桥蛋白抗体(1:32),BLM组和NS组尾静脉注射生理盐水,各组分别于7d、14d、28d处死动物8只。收集肺组织作切片行HE、MASSON染色测定肺泡炎症和纤维化改变,免疫组织化学PAP法测定肺组织中OPN、MMP-9、TIMP-1的表达;RT-PCR测定肺组织Ⅰ/Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果与BLM组比较,在第7天和第14天OPN-Ab组肺泡炎明显减轻(P<0.01);而肺纤维化程度在各时间点均明显减轻(P<0.05);与NS组比较,BLM组、OPN-Ab组肺组织中OPN、MMP-9、TIMP-1表达水平均显著升高(P<0.01)。BLM组第7天OPN、MMP-9、TIMP-1在肺组织中表达水平显著升高,随后下降,第28天时仍高于NS组(P<0.01)。与BLM组比较,OPN-Ab组各时间点OPN、MMP-9、TIMP-1表达水平降低(P<0.01)。OPN-Ab组第7、14、28天肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均较同时间点BLM组明显降低(P<0.05)。OPN可能是肺纤维化形成机制中的重要因素,骨桥蛋白抗体可能通过抑制细胞因子MMP-9、TIMP-1表达,减少肺组织中胶原的生成,最终抑制肺纤维化。