猪流行性腹泻病毒浙江分离株(ZJ-WZ)的N蛋白原核表达

摘要

以猪流行性腹泻病毒(PEDV)标准株CV777为参考毒株设计特异性引物,利用RT-PCR从PEDV浙江流行毒株ZJ-WZ中扩增出核衣壳蛋白(N)基因。将其克隆至p BluscriptⅡKS(+/-)多克隆位点区,经过PCR检测、EcoR I单酶切以及测序鉴定,结果表明成功克隆获得N基因。将N基因亚克隆到原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组表达质粒p ET-30a-PEDV-N,经IPTG诱导、SDS-PAGE和Western blot分析表明,N蛋白获得高效表达。本试验为深入研究PEDV的N蛋白免疫学特性及功能奠定了基础。