四味黄芪散降低低氧性肺动脉高压的机制研究

摘要

目的探讨低氧不同时相内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路参与藏药四味黄芪散降低低氧性肺动脉高压的机制。方法将110只SD大鼠随机分为常氧组、低氧对照组和低氧药物组,后两组根据暴露低氧时间又各分为5个组。常氧组大鼠暴露于西宁地区(海拔2260 m)大气环境,正常喂养;10个低氧组置于模拟海拔5000 m的低压氧舱,其中,5个低氧药物组灌胃给予四味黄芪散混悬液,5个低氧对照组灌胃给予生理盐水,每日1次,持续30 d。分别于暴露低氧第1、3、7、15、30天时测定肺动脉压(PAP)、左右心室比值;并采集肺组织标本,用WB法测定肺组织中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、eNOS、内皮素1(ET-1)蛋白的含量。结果与常氧组比较,低氧对照组大鼠的PAP和左右心室比值逐渐增高,于暴露低氧第7天起显著升高,并随暴露低氧时间的进一步延长而持续增高;低氧药物组大鼠的PAP也随暴露低氧时间的延长而增高,但其增高幅度明显低于低氧对照组。低氧药物组大鼠肺组织eNOS蛋白的水平在急性低氧15 d内均低于常氧组和低氧对照组;于低氧第15天后,低氧药物组eNOS蛋白的水平逐渐升高,超过低氧对照组,于低氧30 d时显著增高,甚至超过常氧组水平。低氧下,eNOS蛋白水平的表达趋势与肺组织中AMPK蛋白及Beclin-1的水平呈高度相关。低氧对照组大鼠肺组织中ET-1蛋白的水平随暴露低氧时间的延长而增高,于低氧第7天时达峰值;低氧药物组大鼠肺组织中ET-1的水平无论在急性低氧期或慢性低氧期均显著低于低氧对照组。结论eNOS蛋白在不同低氧时相呈现不同的水平,四味黄芪散降低低氧性肺动脉高压的机制也不同。急性低氧期主要通过下调ET-1的水平来降低PAP;慢性低氧期主要通过上调eNOS的水平及调控AMPK-eNOS信号通路,抑制平滑肌细胞增殖,降低PAP。