氧化低密度脂蛋白与转化生长因子β_1对骨髓间充质干细胞增殖和分化的不同作用

摘要

目的骨髓间充质干细胞(MSC)移植治疗已经成为治疗心肌梗死的主要途径,但是MSC在体内微环境中是否会被诱导分化为其他细胞而产生副效应如加重再狭窄尚不十分清楚。实验模拟MSC与血管平滑肌细胞(VSMC)混合的微环境,探讨氧化修饰型低密度脂蛋白(ox-LDL)和转化生长因子β1(TGFβ1)对共培养体系中MSC增殖和向平滑肌方向分化的影响。方法建立MSC与VSMC直接共培养体系;利用24孔板进行细胞爬片的培养,MSC先行4,6联脒2苯基吲哚(DAPI)5μg/L标记,然后再与VSMC进行直接避光共培养,分别给予ox-LDL(5 mg/L)和TGFβ1(5μg/L)干预及10%胎牛血清DMEM培养液作为对照,5 d后终止实验,在相同放大倍数高倍视野下计数DAPI阳性细胞核数量,用免疫荧光法检测MSC平滑肌细胞质肌丝蛋白(α-SM-actin)的表达。结果ox-LDL干预显著升高DAPI标记MSC数量[(115.7±23.1)比对照组[(68.3±25.0)/高倍视野,P<0.05],但MSC表达α-SM-actin的阳性率反而较对照组明显下降(13.5%比对照组26.6%,P<0.05);TGFβ1干预组作用相反,DAPI标记MSC阳性细胞核数量[(42.0±12.9)/高倍视野]较对照组[(68.3±25.0)/高倍视野]下降(P<0.05),而MSCα-SM-actin阳性率(40.7%)较对照组(26.6%)明显升高(P<0.05)。结论ox-LDL(5 mg/L)促进直接共培养体系中MSC增殖,但是抑制MSC向平滑肌方向分化,而TGFβ1(5μg/L)抑制MSC增殖,促进MSC向平滑肌方向分化。