不同浓度转化生长因子β1体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究

摘要

目的:研究不同浓度转化生长因子-β1(TGF-β1)在体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的能力.方法:取SD大鼠四肢骨骨髓,密度梯度离心法分离大鼠BMSCs,以TGF-β1 5 μg/L(低剂量组)、10μg/L(高剂量组)对第3代BMSCs进行体外诱导,未诱导的骨髓间充质干细胞做对照.相差显微镜观察细胞形态,MTS试剂盒检测细胞活性.分化14天后,流式细胞仪分析三组细胞DNA周期;免疫荧光法鉴定心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin,cTnI)、心肌平滑肌肌动蛋白(aactin)和心肌肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)的表达率.结果:三组细胞均呈对数生长趋势,诱导组细胞数量增长较对照组缓慢(P＜0.05),诱导组之间比较,细胞增长无明显差异.分析细胞DNA周期显示:诱导14天后,对照组增殖指数明显高于诱导组(P＜0.05),不同浓度诱导组之间比较,细胞增殖指数无明显差异.免疫荧光法检测结果显示:诱导14天后,诱导组细胞均部分表达cTnI、α-actin及MHC,TGF-β1高剂量组细胞转化率高于低剂量组;对照组均不表达cTnI、α-actin及MHC.结论:10μg/L TGF-β1与5μg/L TGF-β1比较,更有效促进BMSCs体外向心肌样细胞分化,且对细胞增殖活性无明显影响.