纳米SiO_2引起肝细胞自噬功能紊乱的研究

摘要

目的研究纳米二氧化硅(Si O2)对肝细胞自噬功能的影响。方法以人肝癌细胞Hep G2为模型,分为对照组和Si O2处理组。用透射电子显微镜观察Si O2粒子的大小、形貌和分散性。细胞处理24 h后,透射电子显微镜观察自噬体的超微结构;激光共聚焦显微镜观察LC3B蛋白在细胞内的分布;Western blot检测Si O2不同剂量处理组中自噬标志蛋白LC3B和p62的表达水平。用自噬抑制剂氯喹预处理,检测Si O2对自噬流的影响。结果透射电子显微镜结果显示Si NPs粒子大小均匀,形貌良好,分散性好,未发生聚集,平均粒径为58.25±7.4 nm。透射电子显微镜下观察到Si O2处理组的细胞内有大量自噬体;激光共聚焦显微镜下观察到Si O2处理组的细胞内出现LC3B的点状聚集;Hep G2细胞中LC3B和p62的蛋白表达水平随Si O2处理剂量的增加而升高,并且高剂量Si O2阻断了细胞自噬流。结论 Si O2诱导Hep G2细胞发生自噬,促进自噬体的产生;Si O2阻断自噬流,抑制自噬体的降解;从而导致自噬体的积累,引起肝细胞自噬功能紊乱。