miR-22-3p对人肺微血管内皮细胞HMGB1/NLRP3信号通路的调控作用

摘要

目的 探究微RNA-22-3p(microRNA-22-3p,miR-22-3p)调控HMGB1/NLRP3通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMEC)炎症反应的影响。方法 取腹腔感染导致的急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)患者和健康对照者外周血行miRNA芯片分析,选定目标miRNA,在HPMEC中分别利用目标miRNA类似物和抑制剂进行预先处理,再利用LPS刺激,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCT)和蛋白印迹法检测高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)和Nod样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization segment like receptor family 3,NLRP3)mRNA和蛋白的表达变化,采用RT-qPCT和酶联免疫吸附试验检测细胞和上清中的相关炎症因子水平。结果 miRNA芯片分析显示,miR-22-3p在ARDS患者的血浆中表达显著下调。与阴性对照组相比,转染miR-22-3p类似物后,HMGB1、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平明显降低,活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)水平显著减少。相应的,炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8、IL-1β的mRNA水平,细胞上清中炎症因子水平均显著降低(均P<0.05);转染miR-22-3p抑制剂后,HMGB1、NLRP3、Caspase-1蛋白和炎症因子的表达水平显著上调(均P<0.05)。结论 miR-22-3p在腹腔感染导致的ARDS患者外周血中显著下调,可在HPMEC中抑制HMGB1/NLRP3信号通路,并抑制其下游炎症反应。