竹荪多糖对亚砷酸钠致人肝细胞毒性的拮抗作用

摘要

目的探讨竹荪多糖对亚砷酸钠致人胎肝（L-02）细胞毒性的拮抗作用。方法将处于对数生长期的L-02细胞分别暴露于含不同浓度[0（对照）-80μmol/L]亚砷酸钠和[0（对照）-160μg/ml]竹荪多糖＋10μmol/L亚砷酸钠的培养液中暴露24 h,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞存活率。将处于对数生长期的L-02细胞分设对照（培养基）组、亚砷酸钠（10μmol/L）组、竹荪多糖（80μg/ml）组和联合处理（10μmol/L亚砷酸钠＋80μg/ml竹荪多糖）组,暴露24 h后,检测细胞培养液中丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、还原性谷胱甘肽（GSH）、细胞色素C（Cyt-C）水平和天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）的活力及B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白、Bcl-2相关X（Bax）蛋白的表达水平。结果与对照组比较,除2.5和5μmol/L亚砷酸钠染毒组外,10-80μmol/L亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势。与对照组比较,40、80和160μg/ml竹荪多糖联合处理组L-02细胞的存活率均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;其中,以80μg/ml竹荪多糖的拮抗效果最好。与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞培养液中MDA和Cyt-C的水平升高,T-SOD、CAT及GSH的水平降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而竹荪多糖组L-02细胞培养液中上述指标均无明显变化。与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞培养液中MDA和Cyt-C的水平降低,T-SOD、CAT及GSH的水平升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞胞内Caspase-3的活力升高,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而竹荪多糖组L-02细胞细胞内Caspase-3的活力无明显变化。与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞内Caspase-3的活力均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。与对照组比较,亚砷酸钠组和联合处理组L-02细胞胞内Bcl-2、Bax蛋白的表达水平升高,Bcl-2/Bax比值降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而竹荪多糖组L-02细胞上述指标均无明显变化。与亚砷酸钠组比较,联合处理组和竹荪多糖组L-02细胞胞内Bax蛋白的表达水平降低,Bcl-2/Bax比值升高;竹荪多糖组L-02细胞内Bcl-2蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论亚砷酸钠可以诱导L-02细胞氧化应激,通过激活线粒体途径的细胞凋亡发挥毒性作用;竹荪多糖可以通过抑制上述机制,拮抗亚砷酸钠所致L-02细胞的毒性作用。