肝癌衍生生长因子对前列腺癌细胞增殖的影响及其机制

摘要

目的探讨人肝癌衍生生长因子(hHDGF)对前列腺癌细胞增殖的影响及相关机制。方法根据hHDGF的干扰靶点构建短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,包装并纯化后稳定转染前列腺癌细胞株DU145和LNCaP。细胞分为2组:(1)含无意义序列的慢病毒转染细胞作为对照组;(2)含靶序列的慢病毒转染细胞作为实验组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hHDGF mRNA表达,CCK-8实验和集落形成实验检测细胞增殖,Western blotting检测细胞内相关蛋白的表达水平。结果成功构建慢病毒载体并稳定转染至前列腺癌细胞株,qRT-PCR和Western blotting结果示,hHDGF mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),CCK-8实验和集落形成实验均显示细胞增殖受到抑制(P<0.05),Western blotting结果示磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PAKT)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(P-mTOR)的表达均下降(P均<0.05)。结论hHDGF表达下调对前列腺癌细胞增殖具有抑制作用,该作用可能与PI3K-AKT-mTOR信号通路改变相关。